Серологическая диагностика сифилиса: Медицинский блог врача скорой помощи. Вопросы

Анализ крови на антитела – выявление инфекционных заболеваний (корь, гепатит, хеликобактер, туберкулез, лямблии, трепонема и др.). Анализ крови на наличие резус-антител при беременности.
Анализ крови на антитела – виды (ИФА, РИА, иммуноблоттинг, серологические методики), норма, расшифровка результатов. Где можно сдать анализ крови на антитела? Цена исследования.
Осмотр глазного дна – как проходит обследование, результаты (норма и патология), цена. Осмотр глазного дна у беременных женщин, детей, новорожденных. Где можно пройти обследование?
Осмотр глазного дна – что показывает, какие структуры глаза можно обследовать, какой врач назначает? Виды осмотра глазного дна: офтальмоскопия, биомикроскопия (с линзой Гольдмана, с фундус-линзой, на щелевой лампе).
Глюкозотолерантный тест – что он показывает и для чего нужен? Подготовка и проведение, нормы и расшифровка результатов. Глюкозотолерантный тест при беременности. Где можно купить глюкозу? Цена исследования.
УЗИ желудка и пищевода – расшифровка результатов, показатели, норма. Что показывает УЗИ при различных заболеваниях желудка и пищевода? Где можно сделать УЗИ желудка и пищевода? Цена исследования.
УЗИ желудка и пищевода – что показывает, какой врач назначает исследование, показания и противопоказания, подготовка и проведение. Как делают УЗИ желудка и пищевода ребенку?
Допплерометрия при беременности – исследование кровотока и сосудов плода, плаценты, матки и маточных артерий. Показатели нормы по неделям, расшифровка результатов.

Серологическое исследование крови на сифилис имеет огромное значение в вопросе диагностики заболевания. Важно понимать, что это не единичный анализ , а целый комплекс исследований крови, назначение которого - подтвердить либо опровергнуть наличие заболевания у человека.

Нельзя сказать, что значимость такого исследования одинакова, вне зависимости от периода протекания болезни. Так, если с момента появления первичного признака - твердого шанкра - прошло не боле трех недель, высока вероятность того, что анализ крови не покажет наличие возбудителя заболевания, введя тем самым человека в заблуждение, что он здоров. Даже по истечении месяца с момента возникновения сифиломы серологический анализ на сифилис не всегда будет положительным, хотя о наличии заболевания у пациента уже говорят и явные внешние признаки.

Процент положительных серологических реакций возрастает со временем - чаще всего в начале вторичной стадии заболевания. На момент, когда у человека проявляются внешние признаки сифилиса вторичной стадии - практически 100% исследований показывают наличие вируса в крови. Достаточно информативен данный анализ крови и при рецидивах болезни - его точность, как и при вторичной форме, достигает 100%. А вот третичный период заболевания распознать при помощи серологического исследования на сифилис довольно сложно: положительный результат будет только примерно у каждого шестого пациента.

Серологические реакции на сифилис для оценки эффективности лечения

Когда человеку назначается противосифилитическая терапия, очень важна постоянная оценка ее эффективности. Так, при обнаружении заболевания в его первичной стадии самое позднее через два месяца после начала лечения анализ должен стать отрицательным, в противном случае стоит задуматься о смене методов лечения. Та же или несколько отличающаяся картина должна наблюдаться при вторичной форме заболевания. Важно понимать, что положительный результат серологического исследования - это не повод увеличивать дозу применяемых препаратов, а необходимость полного пересмотра курса лечения.

При исследовании препаратов крови в третичном периоде заболевания, а также в случае позднего врожденного сифилиса, серологические реакции, как правило, будут положительными вне зависимости от предпринятой терапии. Отрицательными анализы могут стать, в редких случаях, к окончанию курса лечения, а чаще всего - через год-два после его завершения. В отдельных случаях серологическое обследование может показывать положительные результаты всю жизнь. Чаще всего такая ситуация наблюдается у тех, кто плохо лечил заболевание или начал лечение в запущенной форме.

Показатели серологических реакций - как критерий выздоровления

Показателей, свидетельствующих о том, что сифилис полностью излечен - не существует. Несмотря на всю важность таких исследований делать заключение на основании только их - нельзя. Кроме того, именно серологический контроль позволяет своевременно обнаружить рецидив заболевания, даже если явные клинические признаки на данный момент отсутствуют. Важно также понимать, что отрицательные результаты анализов - это еще не гарантия излечения. Для подтверждения выздоровления требуются данные других исследований крови и информация о проводимом лечении.

Серологическая диагностика сифилиса

Диагностика сифилиса основывается на клинических и лабораторных данных. Диагноз сифилиса ставят только после лабораторного подтверждения, т. е. обнаружения бледных трепонем в отделяемом твердого шанкра, эрозивных папул при первичном и вторичном сифилисе, и данных серологического обследования. Серологические реакции являются чрезвычайно ценным методом не только для подтверждения диагноза сифилиса, но и наблюдения за динамикой его течения под влиянием лечения и определения излеченности болезни.

Стандартные компоненты комплекса серологических реакций (КСР) для констатации сифилитической инфекции в настоящее время дополняются трепонемными реакциями: РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем), РИФ (реакция иммунофлюоресценции). Реакция Вассермана (RW, РВ) основана на феномене связывания комплемента. Для ее постановки используют кардиолипиновый антиген, являющийся холестеринизированным спиртовым экстрактом из мышц бычьего сердца и обладающий сходными антигенными свойствами с бледной трепонемой.

Реакция Вассермана. Комплемент связывается комплексом (липоидный антиген и реагин испытуемой сыворотки). Для индикации образовавшегося комплекса используют гемолитическую систему (эритроциты барана и гемолитическая сыворотка).

В группу КСР кроме реакции связывания комплемента с кардиолипиновым и трепонемным антигенами, включена реакция на стекле (экспресс-метод). Выраженность гемолиза при РВ обозначается плюсами:

резко положительная - 4 +; положительная - 3 +; слабоположительная - 2 + или 1 +; отрицательная - -.

Имеет значение и постановка реакции по количественному методу, т. е. с различными разведениями сыворотки (1:10; 1:20 и т.д. до 1:320). Многочисленность стандартных серологических реакций объясняется антигенной мозаичностью бледных трепонем, в связи с чем в сыворотке крови больных возникает соответствующая множественность антител (комплементсвязывающие, агглютинины, преципитины, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию и др.). В каждой стадии сифилиса могут преобладать те или иные антитела и, следовательно, реакции с одними антигенами могут быть уже положительными, а с другими - еще отрицательными. Кроме того, относительная специфичность стандартных серологических реакций вызывает необходимость во избежание диагностических ошибок пользоваться не одной из них, а комплексом реакций. КСР становятся положительными в конце 3-й или в течение 4-й недели после появления твердого шанкра. Эти реакции бывают резко положительными и в значительном разведении сывороток практически у всех больных вторичным свежим (98-99%), вторичным рецидивным (100%), третичным активным (70-80%) и третичным скрытым (50-60%) сифилисом. Однако КСР не является строго специфичным комплексом реакций для сифилиса. Они могут оказаться положительными у больных лепрой, туберкулезом, бруцеллезом, малярией, красной волчанкой, а также при пневмонии, заболеваниях печени, онкологических болезнях, после приема алкоголя, жирной пищи, во время беременности, особенно во второй ее половине, а также в течение первых 2 нед. после родов. С возрастом количество неспецифических ложноположительных результатов КСР увеличивается.

Для обоснованного диагноза сифилиса наряду с данными КСР учитываются клинические данные, результаты исследования на бледную трепонему в манифестных проявлениях первичного и вторичного сифилиса, данные других серологических реакций - РИБТ и РИФ.

РИБТ основана на феномене обездвиживания бледных трепонем антителами типа иммобилизинов, имеющимися в сыворотке крови больных сифилисом. В качестве антигена для РИБТ используют взвесь бледных трепонем, полученных из тканей сифилитического орхита кролика. Бледные трепонемы после добавления к ним сыворотки крови больного прекращают движение, т. е. происходит их иммобилизация. Результаты реакции оценивают в процентах: положительная РИБТ констатируется при иммобилизации от 51 до 100% бледных трепонем, слабоположительная - от 31 до 50%, сомнительная - от 21 до 30% и отрицательная - от 0 до 20%. Реакцию ставят в условиях анаэробиоза. Иммобилизины появляются в сыворотке крови больных позднее, чем другие антитела, поэтому РИБТ становится положительной позже, чем КСР и РИФ. РИБТ является наиболее специфичной из существующих реакций на сифилис. Ее основное назначение - распознавание ложноположительных результатов при постановке КСР. Это особенно важно в отношении больных, у которых сифилис протекает скрыто без наружных проявлений, но с поражением внутренних органов или нервной системы. Особенное значение имеет РИБТ при распознавании ложноположительных результатов КСР у беременных. Следует помнить, что неспецифические положительные результаты РИБТ возможны и у больных саркоидозом, красной волчанкой, туберкулезом, циррозом печени и др. Однако при этих заболеваниях РИБТ бывает слабоположительной (от 30 до 50%) и никогда не достигает 100%). При лечении антибиотиками результаты РИБТ становятся негативными. Поэтому исследования с помощью РИБТ проводятся только через 7 дней, если вводились водорастворимые антибиотики, и через 25 дней после окончания лечения дюрантными антибиотиками.

РИФ - более чувствительная реакция, поэтому она бывает положительной уже в первичном серонегативном периоде сифилиса у 80% больных. По степени специфичности РИФ уступает РИБТ, что не позволяет заменить ею РИБТ, хотя техника ее значительно проще. Реакцию ставят в нескольких модификациях: РИФ-10, РИФ-200 и РИФ-абс. (абсорбированная). РИФ-10 более чувствительна, а РИФ-200 и РИФ-абс. более специфичны. Принцип реакции заключается в том, что специфический антиген (бледные трепонемы) соединяют с сывороткой крови больного (антитела) и антивидовой флюоресцирующей сывороткой (кроличья сыворотка против глобулинов человека, соединенная с флюоресцеином, - веществом, светящимся при ультрафиолетовом свете). При положительной реакции в люминесцентном микроскопе можно видеть желто-зеленое свечение бледных трепонем, поскольку они оказываются окруженными прилепляющимися к ним флюоресцирующими антителами. Степень свечения оценивается плюсами, как и при КСР. Положительная реакция констатируется 4 +, 3 + и 2. +. При степени свечения 1 + и отсутствии свечения реакция считается отрицательной. При вторичном сифилисе РИФ положительна почти в 100% случае. Она всегда положительна при латентном сифилисе (99-100%), а при третичных формах и врожденном сифилисе положительна в 95-100%.

Экспресс-метод (микрореакция на стекле). В этой реакции, так же как и при КСР, используют кардиолипиновый антиген, одну каплю которого смешивают с 2-3 каплями сыворотки крови обследуемого человека в лунках специальной стеклянной пластины. Реакция протекает по механизму преципитации. Общая продолжительность постановки реакции 10-40 мин. Результат оценивают по количеству выпавшего осадка и величине хлопьев; выраженность реакции обозначают плюсами: 4 +, 3 + и т.д., как и КСР. Микрореакция на стекле менее специфична лля больных сифилисом, чем РВ, но несколько превосходит ее по чувствительности. Ложноположительные результаты при экспресс-методе получают чаще, чем при РВ. Поэтому этот метод разрешен для применения только как отборочная реакция при массовых обследованиях населения, диспансеризации и обследовании больных в клинико-диагностических лабораториях соматических больниц. Окончательный диагноз сифилиса на основании этого метода устанавливать запрещено. Только экспресс-метод нельзя применять при обследовании доноров, беременных, а также для контроля после лечения больных сифилисом.

Для диагностики сифилиса можно использовать и другие методы: иммуноферментный анализ (ИФА) с реакцией микропреципитации (РПМ) или реакцией пассивной гемагглютинации (РПГА) с РМП (в том числе зарубежных аналогов РМП - RPR или VDRL).

При проведении клинико-серологического контроля после специфического лечения (для определения эффективности терапии) допускается количественное исследование РМП (изучение титра реакции в динамике).

Иммуноферментный анализ (ИФА, Elisa). Принцип реакции заключается в соединении сифилитического антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя, с антигеном испытуемой сыворотки крови и выявления специфического комплекса антиген-антитело с помощью антивидовой иммунной сыворотки, меченной ферментом. Чувствительность и специфичность ИФА аналогичны РИФ.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Макромодификацию этой реакции именуют ТРНА, микромодификацию - МНА-ТР, автоматизированный вариант - АМНА-ТР.

IgM-серология. В последние десятилетия широко изучается динамика образования антител в организме больных сифилисом до, в процессе и после окончания лечения. Это вызвано тем, что у пациентов, полноценно леченных по поводу сифилиса, в течение длительного времени остаются положительные результаты специфических серологических реакций на сифилис, что усложняет решение вопроса об излеченно-сти больных, а также постановку диагноза раннего врожденного сифилиса. Затруднена также дифференциальная диагностика рецидива заболевания и реинфекции. При изучении антителообразовния в организме больных сифилисом было установлено, что первыми после заражения вырабатываются специфические IgM, выявляемые уже на второй неделе после заражения и достигающие максимальной концентрации в крови на 6-9 неделе. Через 6 мес. после окончания терапии у большинства больных в крови они не определяются. На четвертой неделе после инфицирования организм начинает продуцировать специфические IgG. Этот вид иммуноглобулинов в наибольшем количестве определяется через 1-2 года после заражения. Следует обратить внимание на то, что специфические IgM перестают вырабатываться при исчезновении из организма антигена, а секреции IgG продолжается клонами клеток памяти. Кроме того крупные молекулы IgM не проходят через плаценту от матери к плоду, в связи с чем по их наличию у ребенка судят об его инфицировании бледной трепонемой. Ввиду того, что концентрация в крови специфических IgM закономерно снижается с течением времени, рост титра этих антител может служить вспомогательным признаком наличия рецидива заболевания или реинфекции.

Серологическая диагностика сифилиса

резко положительная - 4 +; положительная - 3 +; слабоположительная - 2 + или 1 +; отрицательная - -.

Если сифилис не лечить, у больного через несколько лет начинают разрушаться внутренние органы. Человек может страдать десятилетиями, а смерть будет болезненной. Анализ на сифилис позволяет вовремя диагностировать заболевание и назначить лечение, прежде всего – антибиотикотерапию. Сколько времени уйдет на лечение, зависит от стадии заболевания и правильно назначенного лечения: на начальном этапе от болезни можно избавиться за три-четыре месяца. Самостоятельно сифилис не лечится.

Возбудителем сифилиса является бактерия, которая называется Бледная трепонема (Treponema pallidum). Она способна проникнуть в организм даже через незначительные повреждения, и хоть передается в основном половым путем, человек может заразиться и через предметы обихода. Правда, следует знать, что бактерия погибает через полчаса при температуре выше 48 градусов. Вот почему важна стерилизация.

Выделяют первичную, вторичную, латентную и третичную стадии сифилиса. Первые признаки недуга – это язва на коже, которая исчезает примерно через 5 недель . Спустя два месяца появляются признаки вторичного сифилиса в форме сыпи, язв и узелков. Одним из тяжёлых осложнений этой формы является поражение почек. Это состояние сопровождается протеинурией – повышенным содержанием белка в тесте мочи (выше 2-3 г/л). Обычно сыпь проходит через несколько недель без лечения.

Если болезнь не лечить, развивается третичный сифилис. Он проявляется через пять лет, когда происходит разрушение внутренних органов. Поражается нервная, сердечно-сосудистая системы, спинной и головной мозг. Выходят из строя почки, печень, желудок, кишечник.

Особенно опасна ситуация, если человек болен ВИЧ. Как и сифилис, ВИЧ наиболее часто передается половым путем и трудно лечится. При этом больные сифилисом подвергаются опасности подхватить ВИЧ, а больные ВИЧ рискуют заболеть сифилисом. Если сифилис подхватил ВИЧ-инфицированный, эффективность лечения зависит от стадии заболевания: чем дольше человек болен ВИЧ, тем больше риск развития тяжёлых осложнений сифилиса (особенно, если ВИЧ-инфицированный не лечится).

Как берут анализ

Если говорить о том, откуда забирают кровь на сифилис, то ответ таков: как и для определения ВИЧ, материал берется из вены. Иногда врач может назначить взять образец из пальца, но только при проведении неспецифических быстрых тестов. Связано это с тем, что многие нормы разработаны для венозной крови: в крови, взятой из пальца, показатели иные. Кроме того, из пальца материала на изучение можно получить меньше, чем из вены. Если же надо взять образец для анализа на сифилис из пальца, применяется та же лабораторная техника, как и для общего анализа крови.

Если исследование крови из пальца показало вероятность наличия бледой трепонемы, необходимо провести более развернутое, расширенное исследование. Кровь на сифилис в этом случае берут только из вены: лишь в этом случае можно получить правильный отрицательный или положительный результат.

Такая разновидность анализа, как мазок, в случае с сифилисом, как и с ВИЧ, неэффективна. В мазке возбудитель болезни отсутствует на всех стадиях заболевания.

Виды исследования

Для определения антител к бледной трепонеме в крови применяются следующие тесты:

РИФ или FTA (реакция иммунофлюоресценции) – определяется реакция поглощения флюоресцирующих антител.
РПГА или TPHA (реакция пассивной гемагглютинации) – анализ на сифилис, выявляющий антитела IgM и IgG.
ИФА или ELISA – название расшифровывается как иммуноферментный анализ, определяет количественное содержание антител IgG и IgM.

Сифилис позволяют обнаружить трепонемные и нетрепонемные анализы. Первый тест на сифилис обнаруживает в крови антитела против антигенов к Treponema pallidum. Второй выявляет антитела против тканей, что разрушила бактерия.

ИФА является эффективным тестовым методом, который делается не только, чтобы определить наличие инфекции, но и определить стадию болезни. Кроме того, ИФА способен дать ответ на вопрос, болел ли данный человек когда-нибудь сифилисом. Чувствительность ИФА может достигать 90%.

Анализ ИФА позволяет определить антитела к Бледной трепонеме: иммуноглобулины – G, M, A. Их концентрация позволяет проследить процесс заболевания в его динамике.

Сразу после инфицирования иммунитет для борьбы с бактерией вырабатывают антитела IgA, через две недели – IgM. Через месяц появляются IgG . Когда начинают проявляться клинические симптомы недуга, кровь на сифилис показывает достаточное количество антител всех трех видов.

Исследования показывают, что специфические к сифилису антитела IgM резко уменьшаются после эффективного лечения. Особенность антител IgG состоит в том, что тест на сифилис выявляет их даже через большое время после излечения и на протяжении всей жизни пациента. Поэтому положительный результат ИФА не всегда значит наличие возбудителя сифилиса. Положительный тест может определить как стадию развития заболевания, так и то, что недавно было проведено эффективное лечение, а потому антитела еще циркулируют в крови. Отрицательный результат ИФА может означать как отсутствие заболевания, так и его раннюю стадию.

Реакция пассивной гемагглютинации

РПГА относится к специфическим трепонемным методам выявления возбудителя бледной трепонемы. При проведении анализа РПГА во время реакции антител и эритроцитов происходит слипание последних и выпадение их в осадок. Сколько осаждённых эритроцитов образуется при РПГА, прямо пропорционально к количеству антител трепонемы.

Чувствительность РПГА намного эффективнее во вторичном и третичном периоде сифилиса – 99%, тогда как в первичном достоверность анализа составляет 85%.

Специфичность РПГА позволяет его использовать для подтверждения диагноза других тестов, таких, как RPR или МРП. В тоже время РПГА не является настолько чувствительным к стадиям сифилиса, так как ИФА. Поэтому РПГА и ИФА надо рассматривать в комплексе друг с другом. Ложный, положительный результат РПГА возможен в 2,5 % случаев. Это возможно из-за сходства иммуноглобулинов с другими антителами, что выделяются при некоторых других заболеваниях, например, аутоиммунных.

Реакция Вассермана

Комплекс серологических реакций (КСР), один из которых известен как реакция Вассермана, является ценным диагностическим методом. Он позволяет как выявить инфекцию, так и определить стадию заболевания. Анализ крови на сифилис КСР в обязательном порядке должен быть дополнен трепонемно-специфическими методами анализа (РИБД и ИФА). Для проведения теста КСР используют антигены, извлеченные из сердечной мышцы крупного рогатого скота, которые по своим свойствам схожи с антигенами бледной трепонемы.

КСР не является специфичным анализом для сифилиса: положительный КСР возможен у больных туберкулёзом, малярией, при аутоиммунных заболеваниях, онкологии, во время беременности и других состояний. Анализ на сифилис при беременности сдавать обязательно, поскольку наличие этого заболевания у беременной может привести к выкидышу или рождению ребенка с врождённым недугом.

Экспресс-метод являет собой ускоренный вариант реакции Вассермана. При проведении экспресс-теста на сифилис также используют кардиолипидный антиген, который смешивают с сывороткой в выемке специальной стеклянной пластины.

Сколько времени уходит на выполнение теста, часто зависит от техники проведения. Обычно время выполнения экспресс-метода составляет около получаса.

Результат реакции экспресс-метода оценивается так же, как и КСР, положительными числами, от 0 до +4. Чувствительность экспресс-метода хоть и превосходит КСР, может выдать ложный положительный результат из-за другой болезни.

ОРС и УМСС являются ещё одним вариантом реакции Вассермана или экспресс метода. Расшифровка аббревиатуры УМСС обозначает ускоренный метод на скрытый сифилис. ОРС расшифровывается как отборочная реакция на сифилис. При проведении ОРС используются те же реактивы, что и при реакции Вассермана.

Как оценить результат

Чтобы получить точные данные, кровь на сифилис надо сдавать натощак. Понятие, натощак означает, что между приёмами пищи должно пройти не менее восьми часов. Если пациент пришёл сдавать анализ натощак, но последний раз принимал пищу меньше, чем за восемь часов, ему необходимо подождать. Понятие натощак также значит, что нельзя употреблять перед анализом любые напитки, кроме негазированной воды. Анализы сдают натощак не только для диагностики сифилиса: это общее правило.

Отрицательный анализ на сифилис обозначается знаком «-». Но отрицательный результат не всегда означает, что возбудителя болезни в организме нет. Чаще ложный отрицательный результат бывает при расшифровке быстрых тестов, основанных на реакции Вассермана. Поэтому расслабиться можно лишь тогда, когда данные всех анализов дадут отрицательный результат.

Самым высоким рейтингом доверия среди больных сифилисом является результат ПЦР . Если ПЦР положительный, это значит, что он действительно положительный. Если расшифровка отрицательна, то – отрицательный. Но ПЦР способен показать положительный результат и после успешного лечения, поскольку способен определить наличие как живой, так и мертвой бактерии. Ложный результат после успешного лечения могут выдать и другие тесты.

Анонимность лечения

Люди, особенно мужчины, нечасто выражают желание регулярно обследоваться у врача. Что касается сифилиса, то причиной этого может быть, как не проявляющие себя симптомы вялотекущего заболевания, так и стыд, нежелание, чтобы окружающие узнали о болезни.

Поэтому очень многие часто соглашаются пройти анонимное обследование, при этом хотят получить гарантию, что лечение также будет действительно анонимным. Конечно же, анонимно сдать анализ на сифилис проблем нет. Они возникают, когда больной хочет анонимно лечиться. Дело в том, что человек является носителем опасной венерической болезни и может заразить как близких ему людей, так и постороннего человека. Поэтому медлить ни в коем случае нельзя и во время лечения обязательно выполнять все указания врача.